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微生物培养基常见的灭菌方法
【打印页面】发布时间：2024-03-28 文章来源：洛肯
微生物菌种培养液是供微生物菌种生长发育、繁育、新陈代谢的混和养分。因为微生物菌种具备不一样的营养成分种类，对营养元素的规定也不尽相同，加上科学研究的目地不一样，因此培养液的类型许多，应用的原材料也都有差别，但从营养成分视角剖析，微生物菌种培养液中一般带有微生物所必不可少的氮源、氮源、碳酸盐、生长素及其水份等。此外，培养液还应具备适合的pH值、一定的缓存工作能力、一定的氧化还原反应电位差及适合的血浆渗透压。以便做到特殊规定的科学研究，需要开展培养液配置和杀菌，那麼微生物菌种培养液该怎样配置与杀菌呢?
方法：
1、仪器设备灭菌：化学灭菌、辐射灭菌、干热灭菌、湿热灭菌
化学灭菌主要针对器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌，使用甲醛、高锰酸钾等灭菌剂；
用辐射灭菌于室内空气及器皿表面灭菌，如常用的有紫外线、X射线和γ射线。
干热灭菌一般常用灼烧和电热箱加热，140-180℃ 1-2小时。适于对玻璃及金属用具及沙土管灭菌。
湿热灭菌指的是水煮常压灭菌：100℃、或饱和蒸汽灭菌：一般121℃，30分钟。适合培养基或发酵的设备灭菌
2、培养液或/发酵液：过滤除菌
过滤除菌原理是利用微生物不能透过滤膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔径滤膜，利用负压过滤或压缩空气用于酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌
过滤除菌常用的负压抽滤装置：
500ml以下容量培养液除菌的话，可以采用R300-LF50-500，可以把500ml的血清瓶放入抽滤瓶里，过滤后的液体直径引入血清瓶，然后取出保存。配置的漏斗为500ml容量，可以一次性过滤完500ml（含）以下容量的培养基。配置的漏斗、抽滤瓶、血清瓶均可蒸汽高压灭菌。
大容量的培养基除菌，采用L200-5CPES,配置的围篱笆式一体真空泵，可以放置3000ml的血清瓶，不会产生因外界产生的磕碰等原因，导致抽滤瓶倾斜摔倒，至培养液流掉浪费。而且可以根据需求更换小于3000ml的GL45血清瓶作为抽滤瓶，灵活方便。配置的漏斗及血清瓶、GL45转接器、矽胶管均可蒸汽121°灭菌，确保设备的无菌。
方法：
1、仪器设备灭菌：化学灭菌、辐射灭菌、干热灭菌、湿热灭菌
化学灭菌主要针对器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌，使用甲醛、高锰酸钾等灭菌剂；
用辐射灭菌于室内空气及器皿表面灭菌，如常用的有紫外线、X射线和γ射线。
干热灭菌一般常用灼烧和电热箱加热，140-180℃ 1-2小时。适于对玻璃及金属用具及沙土管灭菌。
湿热灭菌指的是水煮常压灭菌：100℃、或饱和蒸汽灭菌：一般121℃，30分钟。适合培养基或发酵的设备灭菌
2、培养液或/发酵液：过滤除菌
过滤除菌原理是利用微生物不能透过滤膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔径滤膜，利用负压过滤或压缩空气用于酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌
过滤除菌常用的负压抽滤装置：
500ml以下容量培养液除菌的话，可以采用R300-LF50-500，可以把500ml的血清瓶放入抽滤瓶里，过滤后的液体直径引入血清瓶，然后取出保存。配置的漏斗为500ml容量，可以一次性过滤完500ml（含）以下容量的培养基。配置的漏斗、抽滤瓶、血清瓶均可蒸汽高压灭菌。
大容量的培养基除菌，采用L200-5CPES,配置的围篱笆式一体真空泵，可以放置3000ml的血清瓶，不会产生因外界产生的磕碰等原因，导致抽滤瓶倾斜摔倒，至培养液流掉浪费。而且可以根据需求更换小于3000ml的GL45血清瓶作为抽滤瓶，灵活方便。配置的漏斗及血清瓶、GL45转接器、矽胶管均可蒸汽121°灭菌，确保设备的无菌。