内容大纲 

什么是 HPLC ?
为什么 HPLC 移动相需要过滤呢?
为什么过滤能提升 HPLC 分析稳定性?
怎么进行 HPLC 移动相过滤？
ROCKER 完整溶剂纯化解决方案
如何选择滤膜?

什么是 HPLC ?

高效液相层析法 (high performance liquid chromatography, HPLC) 是一种高效的分离及分析技术，
能够对混合物进行分离，并定量分析各成分比例。HPLC 已被广泛用于各个科学领域，
如药物、食品、化妆品、保健品、毒品、法医鉴定、环境基质等。

为什么 HPLC 移动相需要过滤呢?

在 HPLC 中，移动相 (mobile phase) 的质量会直接影响结果的准确性、再现性 (reproducibility)
及仪器的使用寿命。常见的移动相如乙腈 (acetonitrile, ACN)、甲醇 (methanol, MeOH)
或甲酸 (formic acid) 等，可能存在气泡 (bubble)、颗粒 (particle)、污染物 (impurity)
或微生物 (microorganism) 等杂质。这些杂质会对 HPLC 系统造成许多负面影响，
如管柱阻塞 (column clogging)、产生大量噪声 (noise) 及背景值 (background)、影响使用寿命等。

不过滤移动相会有什么影响？

§ ◆管柱堵塞：颗粒堆积会影响流速稳定性，导致滞留时间漂移，并可能缩短管柱使用寿命。

§◆ 帮浦损坏：微粒可能磨损帮浦活塞 (piston) 与密封件 (seals)，导致基线 (baseline) 漂移和流速波动。

§◆ 系统堵塞：可能导致系统背压升高 (high back pressure)，造成停机。

◆§ 干扰分析结果：与管柱材料作用，造成图谱 (chromatogram) 噪声及背景值上升，甚至产生伪峰。

§◆ 微生物污染：若移动相为水性缓冲液，可能导致微生物在其中繁殖、产生污染物，进而影响结果及堵塞系统。

◆此外，许多 HPLC 方法需要混合溶剂使用并/或添加盐类 (salts)，
例如磷酸盐 (phosphates) 或醋酸盐 (acetates) 等。
这些额外的混合步骤或添加物可能因未完全溶解而产生微粒，
因此在使用前仍建议进行过滤，以确保溶液的纯净程度。
因此，为了保护 HPLC 系统、延长层析管柱 (HPLC column) 的使用寿命，
并获得一致、准确、可重现的分析结果，
HPLC 移动相的过滤是必不可少的关键步骤。

为什么过滤能提升 HPLC 分析稳定性?

真空过滤 (vacuum filtration) 是一种常用的移动相过滤方法，

§ ◆其可以有效去除颗粒及污染物，可避免系统阻塞，减少污染与磨损，
§ ◆延长耗材使用寿命。也因污染物被移除而降低噪声，使分析结果更清晰、更具可信度。
§ ◆此外，真空过滤还同时具有脱气 (degas) 的作用，可去除溶剂中溶解的氧气 (oxygen)，
§ ◆减少样品及溶剂的氧化降解 (oxidative degradation)，
§ ◆从而提升系统稳定性 (stability) 及侦测器 (detector) 的灵敏度 (sensitivity)。
§ ◆简而言之，过滤移动相是维护 HPLC 性能并实现高质量分析最简单且经济的方法。

怎么进行HPLC移动相过滤？

传统 HPLC 溶剂过滤时，通常使用玻璃过滤漏斗及锥形瓶，但存在以下风险：

◆过滤后需将溶剂转移 (transfer) 至储存瓶或血清瓶中，可能导致泄漏及交叉污染风险。

◆ 需手动将溶剂抬高并倒入漏斗，溶剂容易因倾倒角度或手部不稳而溢出。

◆对于具挥发性 (volatility) 或毒性 (toxicity) 的溶剂，

◆其蒸气 (vapor) 可能直接接触操作者的眼、口、鼻等敏感部位，长期暴露下恐对健康构成威胁。

ROCKER 完整溶剂纯化解决方案

全新推出的连续过滤装置 – 满足您过滤大量溶剂的需求 

Rocker 300C – VFC 47 

§ ◆连续进样、直接储存于血清瓶中，无需手动倒入样品，避免交叉污染

§ ◆标配沉头，可大量抽吸液体，减少残留

§ ◆标配 GL45 过滤转接座，过滤后可直接将滤液直接保存于 GL45 血清瓶中，不需分装，避免二次污染

VFC 连续溶剂纯化过滤系统装置图如下，详情可参考安装影片，或参考以下文字说明

1. 组装设备：
GL45 玻璃瓶上，依序装上 GL45 转接过滤座及 VFC 47 连续玻璃过滤漏斗，
并分别将硅胶管依图面连接。
* 若使用三角抽气瓶或锥型瓶 (flask)，请直接将 8 号硅胶塞塞入瓶口或更换硅胶塞尺寸。

2. 放置滤膜或滤纸：
在 VFC 47 滤膜垫片上方放置滤膜后，再放回上盖并以铝夹夹紧。

3. 过滤：
将已连接硅胶管的沉头放入未过滤的液体，启动真空帮浦，开始过滤。

4. 储液：
过滤完毕后，移除硅胶管、漏斗、转接座，并关闭真空帮浦，
盖上原本 GL45 瓶盖，即可直接保存溶液。

如何选择滤膜?

选择合适的滤膜是确保过滤效果的关键，可根据不同的HPLC系统及目的进行选择：

滤膜材质部份，则须依溶剂 (液) 特性挑选，常见的材质包含：PTFE、PVDF、Nylon 等。
以下列举台湾卫生福利部食品药物管理署公告/建议方法中移动相过滤所使用的滤膜类型：

应用：

HPLC 移动相过滤

溶剂纯化与脱气

微生物及污染物去除

参考文献

· Mobile phase filtration

· 过滤对优化 (U)HPLC 和 LC-MS 性能的重要性

·  Top Tips for LC-MS Sample Preparation